利奈唑胺对颅内感染小鼠血清心肌酶和脑脊液乳酸脱氢酶的影响

张华

(山西省襄汾县人民医院 神经内科，山西 临汾 041500)

利奈唑胺对颅内感染小鼠血清心肌酶和脑脊液乳酸脱氢酶的影响

张华Δ

(山西省襄汾县人民医院 神经内科，山西 临汾 041500)

目的 探讨利奈唑胺对金黄色葡萄球菌菌液诱导建立的小鼠颅内感染模型中血清心肌酶和脑脊液乳酸脱氢酶的影响。方法 将75只小鼠随机分为5组：分别为对照组、模型组和利奈唑胺高、中、低剂量组(2.0、1.0、0.5 mg/kg)。通过颅内定点注射金黄色葡萄球菌菌液的方法建立小鼠颅内感染模型，利奈唑胺组给予不同剂量利奈唑胺治疗，对照组和模型组给予0.9%NaCl注射液治疗，给药15 d后，测定小鼠血清心肌酶[天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase，AST)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase，LDH)、肌酸激酶(creatine kinase，CK)]以及脑脊液乳酸脱氢酶(cerebrospinal fluid lactate dehydrogenase，CSF LDH)水平。结果 模型组血清心肌酶及CSF LDH均明显高于对照组(P<0.01)；与模型组相比，利奈唑胺低剂量组血清心肌酶及CSF LDH水平差异无统计学意义，中剂量组血清心肌酶及CSF LDH水平均有降低(P<0.05)，高剂量组血清心肌酶及CSF LDH水平降低明显(P<0.01)，且高剂量组血清心肌酶及CSF LDH水平明显低于中剂量组(P<0.01)。结论 利奈唑胺对金黄色葡萄球菌所致颅内感染有确切疗效，表现出明显的量效关系。

利奈唑胺；颅内感染；心肌酶；乳酸脱氢酶

颅内感染是颅脑手术常见的并发症，也是常见的中枢系统感染性疾病，如治疗不及时，将导致严重后遗症，甚至引起死亡[1]。因此，对颅内感染的有效治疗具有重要意义。心肌酶存在于心肌、骨骼肌、肝脏、肾脏及脑组织中，在发生颅内感染时，血清心肌酶：天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase，AST)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase，LDH)、肌酸激酶(creatine kinase，CK)以及脑脊液乳酸脱氢酶(cerebrospinal fluid lactate dehydrogenase，CSF LDH)会有不同程度的改变[2]。利奈唑胺是一种人工合成的唑烷酮类新型抗生素，目前在感染性疾病的治疗中有较好的效果，为了探讨利奈唑胺对颅内感染的治疗效果，本研究通过注射金黄色葡萄球菌感染来建立颅内感染动物模型，并给予不同剂量的利奈唑胺治疗，通过观察利奈唑胺对颅内感染小鼠血清心肌酶(包括AST、LDH、CK)和CSF LDH水平的影响，了解利奈唑胺对颅内感染的治疗效果。

1 材料与方法

1.1 材料 实验动物：SPF级雌性昆明种小鼠75只，体质量(20.0±1.3)g，6～8周龄，购自第四军医大学实验动物中心(批号：FFMULAC201410)，实验中对小鼠的饲养及相关实验操作严格按照国家科学技术委员会颁布的《实验动物管理条例》进行。

试剂：注射用戊巴比妥钠购自济宁辰欣医药(国药准字：H31021724)，金黄色葡萄球菌菌液购自中国食品药品检定研究院，利奈唑胺注射液购自Pfizer Pharmaceuticals LLC(批准文号H20130609)，AST、LDH及CK试剂盒均购自宁波普瑞柏生物技术有限公司。其余国产试剂均为分析纯。

仪器：小鼠用脑立体定向仪(深圳瑞沃德生命科技有限公司，型号68510)，全自动生化分析仪(日本日立，型号7170A)。

1.2 方法

1.2.1 实验动物分组及处理：将75只小鼠随机分成5组，分别为对照组、模型组、利奈唑胺高剂量组、中剂量组和低剂量组，每组15只。所有小鼠用1%戊巴比妥钠(30 mg/kg)经腹腔内注射进行麻醉，麻醉后，用脑立体定向仪固定其头部，定位额叶颅骨穿刺点并用标记笔做好标记，用碘伏将标记处头部皮肤消毒3遍，用经灭菌后的微量进样器吸取5 μL金黄色葡萄球菌菌液(5×106CFU)，于穿刺点垂直进针约2 mm，缓慢注入菌液[3]，对照组小鼠用相同方法注射等量的0.9%NaCl注射液。造模结束后，利奈唑胺高、中、低剂量组小鼠通过尾静脉注射分别给予不同剂量(2.0、1.0、0.5 mg/kg)的利奈唑胺(利奈唑胺注射液浓度为2 mg/mL)，对照组和模型组给予等剂量的0.9%NaCl注射液，每天给药2次(分别为8:00，16:00)，连续给药15 d，治疗结束后进行相关指标检测。

1.2.2 血清心肌酶检测：治疗结束后，各组小鼠经眼眶采取血样约0.3 mL，离心后取其血清，置4 ℃保存。按照试剂盒步骤操作，采用全自动生化分析仪检测血清中AST、LDH、CK含量。

1.2.3 脑脊液乳酸脱氢酶检测：治疗结束后，采用硬脊膜穿刺抽取脑脊液法采集脑脊液样本0.1 mL[4]，按照试剂盒步骤操作，并通过全自动生化分析仪检测CSF LDH的含量。

2 结果

2.1 利奈唑胺对血清心肌酶的影响 模型组AST、LDH、CK水平均高于对照组(P<0.01)。与模型组比较：利奈唑胺低剂量组AST、LDH、CK水平差异无统计学意义，利奈唑胺中剂量组AST、LDH、CK水平降低(P<0.05)，高剂量组AST、LDH、CK水平降低(P<0.01)。与高剂量组相比，中剂量组AST、LDH、CK水平差异无统计学意义。见表1。

表1 利奈唑胺对AST、LDH、CK的影响

**P<0.01，与对照组比较，compared with control group；#P<0.05，##P<0.01，与模型组比较，compared with model group；△△P<0.01，与高剂量组比较，compared with high dose group

2.2 利奈唑胺对CSF LDH的影响 模型组CSF LDH水平明显高于对照组(P<0.01)。与模型组比较：低剂量组CSF LDH水平无差异，利奈唑胺高剂量和中剂量组CSF LDH水平明显降低，有显著性差异(P<0.01)。与高剂量组相比，中剂量组CSF LDH水平有显著性差异(P<0.01)。见表2。

表2 利奈唑胺对CSF LDH的影响

**P<0.01，与对照组比较，compared with control group；##P<0.01，与模型组比较，compared with model group；△△P<0.01，与高剂量组比较，compared with high dose group

3 讨论

开颅术后的颅内感染是一种严重的并发症，也是常见的中枢系统感染性疾病，如不能及时有效治疗，将导致严重后遗症，死亡率和致残率极高[5]。已有文献[6]报道，其发生率为1.8%～8.9%，死亡率达3.8%～30%。颅内感染大多发生在手术后3～7 d，通常由化脓性细菌所致，如葡萄球菌、大肠杆菌、脑膜炎双球菌、链球菌以及肺炎球菌等，其中，金黄色葡萄球菌是引起颅内感染的主要致病菌[1,7]。临床上引发颅内感染的途径主要有4种：直接感染、病灶感染、血行感染和经由脑脊液通路所致感染。颅内感染一旦发生，发病异常迅速，病情十分严重，再加上大多数抗菌药物难以通过血脑屏障，更是增加了其在临床上的治疗难度。由于神经系统功能受损后难以恢复，因此，正确的早期诊断与及时有效的治疗，是拯救患者和保护其神经系统功能的关键所在。

目前，利奈唑胺是临床上使用较多的抗感染药物[8]。利奈唑胺是通过抑制细菌蛋白质的合成来发挥其抑菌作用[9]。它与其他类抗菌药无交叉耐药，对葡萄球菌、抗甲氧西林金黄色葡萄球菌、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等均有较强的抑菌作用，对甲氧西林耐药或敏感葡萄球菌的抑制率均为100%。并且，利奈唑胺能够高效通过血脑屏障，用于治疗颅内感染效果显著。

研究表明，血清心肌酶含量的增高是颅内感染的重要标志之一[10-11]，血清心肌酶含量的增高可能是由于神经细胞变性坏死、酶的漏出及血脑屏障的破坏而引起血心肌酶升高。本研究中，颅内感染小鼠血清心肌酶水平与对照组相比均有明显增高(P<0.05)。另有文献报道[12-13]，颅内感染期脑脊液中也有心肌酶改变，尤以LDH改变最为显著，可作为鉴别诊断颅内感染的有效指标。本研究结果表明，颅内感染小鼠的CSF LDH水平发生明显改变，远高于对照组水平(P<0.01)，并经过相关分析发现，CSF LDH水平与血清LDH水平不存在相关性，说明CSF LDH不是血清LDH通过血脑屏障而来。经分析推测，升高的CSF LDH可能是来源于脑组织损害时神经细胞内酶的溢出或渗出，有待于进一步研究验证。

综上所述，利奈唑胺能降低颅内感染小鼠血清心肌酶和CSF LDH水平，对颅内感染有确切疗效，且呈现良好的量效关系。

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(编校：王俨俨)

Effect of linezolid on serum myocardial enzyme and cerebrospinal fluid lactate dehydrogenase in intracranial infection mice

ZHANG HuaΔ

(Department of Neurology, The Xiangfen People’s Hospital of Shanxi Province, Linfen 041500, China)

ObjectiveTo study the effect of linezolid on serum myocardial enzyme and cerebrospinal fluid lactate dehydrogenase (CSF LDH) in intracranial infection mice. MethodsThe seventy-five mice were divided into five groups randomly: control group, model group, linezolid of high, medium and low dose group. The model of intracranial infection was established by injecting staphylococcus aureus into mice cranium. The mice in linezolid group were treated with different doses of linezolid, the control group and model group were treated with physiological saline. After 15 days with drug, detect the serum myocardial enzyme and CSF LDH level.ResultsThe myocardial enzyme and CSF LDH level of model group were higher than control group obviously (P<0.01); compared with the model group, the myocardial enzyme and CSF LDH level of low dose group have no diffrence; the myocardial enzyme and CSF LDH level of medium dose group were reduced (P<0.05); the high dose group has an obvious reduction in myocardial enzyme and CSF LDH (P<0.01). And the myocardial enzyme and CSF LDH level of high dose group were lower than the low dose group significantly (P<0.01). ConclusionLinezolid has an exact effect on intracranial infection caused by staphylococcus aureus, with significant dose-effect relationship.

linezolid; intracranial infection; myocardial enzyme; lactate dehydrogenase

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.06.15

张华，通信作者，男，本科，副主任医师，研究方向：颅内感染药物，E-mail: zhanghua041500@yeah.net。

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