紫铆因通过自噬途径促进骨肉瘤细胞凋亡及机制研究

蔡宁宇 潘天龙 李斌 吴登颖 潘骏

紫铆因通过自噬途径促进骨肉瘤细胞凋亡及机制研究

蔡宁宇 潘天龙 李斌 吴登颖 潘骏

目的研究紫铆因对骨肉瘤细胞凋亡及自噬的影响，并探讨自噬在紫铆因抗骨肉瘤中的作用。方法分别以不同浓度紫铆因作用骨肉瘤细胞24h和30μmol/L紫铆因作用骨肉瘤细胞不同时间，使用CCK-8试剂盒测定细胞活性变化；Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase3及自噬相关蛋白p62、LC3、Beclin-1的表达情况；TUNEL染色检测骨肉瘤细胞的凋亡情况；透射电子显微镜检测自噬泡的产生；最后分别用自噬激动剂和自噬抑制剂预处理后再加入紫铆因作用于骨肉瘤细胞，并重复上述实验。结果紫铆因作用后，骨肉瘤细胞的活性明显下降，Bax、Cleaved caspase3、Beclin-1、LC3 II的表达增加，而Bcl-2、p62的表达降低，骨肉瘤细胞出现明显的凋亡现象，透射电子显微镜观察到紫铆因处理组有较多自噬泡产生；使用自噬抑制剂预处理骨肉瘤细胞后，紫铆因对骨肉瘤的凋亡效果被逆转，而使用自噬激动剂预处理骨肉瘤细胞后，紫铆因使骨肉瘤细胞凋亡的效果进一步增强。结论紫铆因可以降低骨肉瘤细胞活性并促进其凋亡；同时紫铆因可以激活自噬，促进骨肉瘤细胞凋亡。

紫铆因骨肉瘤凋亡自噬

骨肉瘤的发病率在骨骼恶性肿瘤中居首位，其恶性程度高，易发生肺转移，进展迅速。1982年，Rosen提出新辅助化疗的概念，使阿霉素、顺铂、甲氨蝶呤等药物[1-2]广泛应用于骨肉瘤治疗，患者的5年生存率显著提高[3-4]。然而骨肉瘤拥有易复发、易转移的特性，患者的长期生存率并没有进一步提高[5]。……