甘草浸膏对小鼠免疫功能的影响研究*

徐海星，胡 伟

（1．武汉理工大学化学化工与生命科学学院，湖北 武汉 430070； 2．江西省卫生计生监督所，江西 南昌 330006）

甘草为豆科植物甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch．、胀果甘草 Glycyrrhiza inflata Bat．或光果甘草Glycyrrhiza glabra L．的干燥根和根茎，春、秋季采挖，除去须根，晒干而得。甘草属多年生草本，是一种补益中药。中医认为，甘草有益气补中、缓急止痛、润肺止咳、泻火解毒、调和诸药的功效。近代医学研究发现，甘草及其提取物具有抗细菌、病毒的作用[1－3]。近来的一些研究表明，甘草具有增强免疫力的作用[4]。甘草提取物中，研究最多的有效成分为甘草酸及其盐类（即甘草甜素）和甘草多糖。但关于甘草提高机体免疫力量效关系的研究不多。本研究中拟以人体推荐日摄入量的10倍、20倍、30倍设置低、中、高3个剂量组，以小鼠为模型进行试验，以系统研究甘草提高机体免疫力作用的剂量。现报道如下。

1 材料与方法

1．1 动物

SPF级昆明种雌性小鼠40只，体质量18～22 g，湖北省实验动物研究中心提供，实验动物生产许可证号为SCXK ＜鄂 ＞2003－0005）。在温度为 22～26℃、相对湿度为40%～70%的环境下饲养，实验动物使用许可证号为SYXK＜鄂＞2003－0014。

表1 甘草提取物对淋巴器官／体质量比值的影响（n＝10）

表2 甘草提取物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响（n＝10）

1．2 方法

甘草浸膏提取：取甘草饮片，加水煎煮3次，每次2 h，合并煎液，放置过夜，沉淀，取上清液，浓缩至稠膏状，干燥，磨成细粉，即得。所得原料为棕褐色的块状固体或粉末，有微弱的特殊臭气和持久的特殊甜味，甘草提取得率为24%。

分组与处理：将提取所得甘草浸膏直接溶于水，配成适宜浓度，按人群推荐日摄入量 0．02 g ／kg（1．2 g ／d）扩大10倍、20倍、30倍，设置低、中、高3个剂量组，即0．2，0．4，0．6 g／kg，将 40 只小鼠均分为空白对照组及低、中、高剂量组，对各组小鼠连续灌胃30 d，给药体积为每10 g体质量0．20 mL。

免疫功能检测：根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中的功能学评价检验对小鼠免疫功能进行测定。试验包括迟发型变态反应(DTH)、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、淋巴器官／体质量比值测定、碳廓清实验、小鼠淋巴细胞转化实验、自然杀伤(NK)细胞活性测定、血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测。

1．3 统计学处理

采用SAS软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差表示，行 t检验。P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

结果见表1至表4。各组动物间胸腺／体质量比值和脾脏／体质量比值无明显差异（P＞0．05）。与空白对照组比较，甘草浸膏高剂量组小鼠刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞增殖能力显著增强（P＜0．05），二硝基氟苯(DNFB)诱发的 DTH 显著增强（P＜0．05），血清溶血素含量显著升高（P＜0．05），吞噬率、吞噬指数明显提高（P ＜0．05），小鼠碳廓清吞噬指数显著提高（P ＜0．01），抗体生成细胞能力明显增强（P＜0．05）。甘草浸膏各剂量组小鼠自然杀伤(NK)细胞活性未明显增强（P＞0．05）。

表3 甘草提取物对小鼠细胞免疫功能及体液免疫功能的影响（n＝10）

表4 甘草提取物对小鼠碳廓清功能、抗体生成细胞功能及NK细胞活性的影响(n＝10)

3 讨论

中医认为，人体精力旺盛，正气存内，邪不可干。甘草和中益气，有调补劳损内伤、脾气虚弱、元阳不足、肺气衰虚之功效，其甘温平补，可增强免疫功能。甘草作为一种食药两用的原料，在食品和保健食品中已得到广泛应用。甘草浸膏人体推荐用量为1．2 g／d，甘草提取得率为24%，折合每人每天食用甘草饮片5 g。按照《保健食品检验与评价技术规范》的评价标准，每人每天5 g甘草对正常动物具有增强免疫力的作用；《中华人民共和国药典(一部)》规定，成人每天服用甘草的剂量为2～10 g。本研究结果表明，药典推荐用量中位数具有免疫调节功能，为药典的用量制订提供了实验室依据。

甘草含三萜类、黄酮类、生物碱类和多糖类物质。甘草的根和根茎含三萜皂苷甘草酸，即甘草甜素，是甘草甜味的主要来源。其加水分解后可产生2分子葡萄糖醛酸和1分子18β－甘草次酸。甘草次酸是甘草甜素结构中的活性部分。甘草尚含24－羟基甘草次酸等，亦含有甘草皂苷 A3，B2，C2，D3，F3，G2，H2，J2，K2。虽然甘草水提制得的甘草浸膏标志性成分非常复杂，包括三萜类（甘草酸）、黄酮类（甘草黄酮）、生物碱类和多糖类物质（中性多糖）[5－9]，但主要为甘草酸。大量研究表明，甘草酸和甘草多糖可增强免疫功能[8－10]。

本研究中，甘草浸膏的提取采用水煎煮3次，再经沉淀、浓缩、干燥制成，该工艺能有效提取甘草中的多糖和甘草酸有效成分。

本研究结果显示，高剂量甘草浸膏能明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、DNFB诱导的小鼠DTH、小鼠血清溶血素水平、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能、小鼠碳廓清能力、抗体生成细胞能力。

但本研究中未采用免疫功能低下动物进行实验，而用免疫功能低下模型更能证明甘草的扶正作用能力。

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