Hippo信号通路介导PTEN调节PI3K/AKT/mTOR信号通路影响肝癌细胞增殖能力

徐 瑞,李丽娜,王文娟

(1陕西省肿瘤医院内一科,西安 710061;2西安交通大学第一附属医院肿瘤内科;*通讯作者,E-mail:lingyinnancy@163.com)

Hippo信号通路在哺乳动物器官发育大小的调节及细胞的增殖和凋亡过程中起着重要的作用[1]。YAP(Yes-associated protein)是一种转录共激活因子,是Hippo信号通路下游的主要效应成分[2]。Hippo信号通路的工作方式是由核心的激酶级联反应完成,上游的Mst磷酸化并激活Lats,活化的Lats磷酸化YAP蛋白,使其降解,Hippo信号通路处于激活;当上游分子Mst及Lats失活时,使得YAP蛋白的降解受到抑制从而抑制了Hippo信号通路[3,4]。近年来对Hippo信号通路在肿瘤发生发展中作用的研究表明,其在肺癌、结肠癌、乳腺癌及前列腺癌等中发挥着重要作用[5,6]。Hippo信号通路控制哺乳动物肝细胞的增殖,肝脏大小的调节以及肝癌的发生[7,8]。通过敲除上游分子Mst1抑制通路的激活使得YAP蛋白表达上调显著增加了肝癌细胞的增殖能力,同时发现S6K磷酸化水平增加[9],然而Hippo信号通路效应分子YAP通过何种途径促进肝癌细胞的增殖能力,成瘤能力及其与PI3K/mTOR之间是否存在通路间的相互调节作用目前仍不清楚。

本研究通过在肝癌细胞中过表达Hippo信号通路的效应分子YAP,研究其与mTOR信号通路之间的关系,阐述其增加肝癌细胞增殖能力和成瘤能力的机制,为靶向Hippo信号通路及寻找肝癌治疗靶点提供理论基础。

1 材料和方法

1.1 试剂

细胞培养液RPMI1640购自Gibco BRL公司;氨卞青霉素钠、硫酸链霉素、雷帕霉素(Rapamycin)和G418试剂购自美国Sigma公司;胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)购自Hyclone公司;鼠抗人YAP、mTOR、兔抗人PTEN和AKT及P-AKT多克隆……