关于影响检测食糖中螨的相关因素的探讨

苏俊婷，刘学文*，罗炜诗，彭子慧，杨梦真，郭剑雄*

(1广东省科学院生物工程研究所，广东广州510316；2中国轻工业甘蔗制糖工程技术研究中心，广东广州510316)

0 引言

我国是食糖的生产和消费大国[1-2]，在2017/18年至2019/20年这3个榨季中，中国食糖产量在1000万t上下波动，食糖年消费量大致稳定在1500万t[3-4]。食糖在加工、运输和储藏过程中都有可能被污染，滋生螨虫[5-7]。食糖中的螨被误食进入人体消化道，螨的螯肢、体毛和棘刺，螨类的新陈代谢产物、排泄物、螨体死亡后的产物、体毛及螨体内释出的毒素等均可能引发不同程度的腹痛、腹泻等消化道症状，其严重程度与侵入的螨量及机体对螨的过敏程度有关[8-10]。

日常检测食糖中螨的方法是依据GB 13104-2014[11]食品安全国家标准《食糖》的相关规定，标准中要求每个样品静置15 min左右再取下载玻片镜检，一旦检出需再次静置15 min左右取下镜检，直至未检出螨为止，该方法检测耗时长。目前针对溶解水温和溶解方式对食糖中螨的检出率的研究鲜见报道。本文将通过比对水的温度、溶解方式和静置时间对白砂糖中螨检出率的影响，探讨影响螨的检出率的因素，以期为GB 13104-2014《食糖》标准中螨的检测方法的优化提供参考数据。

1 材料与方法

1.1 样品制备

临用前将实验室饲养的螨经酒精灯加热处死，用0号毛笔挑取10或30头死螨至250 g经检测未检出螨的白砂糖中充分混匀后备用。

1.2 试剂与仪器

三级水；载玻片；1000 mL锥形瓶；SilentShake磁力搅拌器(美国CRYSTAL公司)；SMZ745体视显微镜(尼康仪器上海有限公司)；L2050光学显微镜(广州光学仪器厂)。

1.3 方法

参照GB 13104-2014，添加温度为25℃的水至1000 mL锥形瓶的2/3处，置于磁力搅拌器上充分溶解后，补充25℃水至瓶口处水不溢出，液面与洁净载玻片完全接触为止，分别静置5、10和15 min后取下镜检，分别添加温度为4、25、30、40、50和80℃的水至1000 mL锥形瓶的2/3处，一组用洁净的玻璃棒搅拌至充分溶解，另一组放置于磁力搅拌器上充分溶解后，分别补充原溶解温度的水至瓶口处水不溢出，液面与洁净载玻片完全接触为止，静置15 min后取下镜检，直至未检出螨为止。

1.4 统计学分析

采用SPSS 22.0软件进行统计分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。使用Origin 2015对实验数据进行绘图。

2 结果与分析

2.1 静置时间对螨检出率的影响

25℃水温下，不同静置时间的螨的检出率如表1所示：

表1 静置时间对螨检出率的影响

采用单因素ANOVA方差分析比较静置5、10和15 min的螨的检出率，结果表明对添加螨量较少(10头)和添加螨量较多(30头)的情况，螨的检出率都不能达到100%，添加螨量为10头时，静置时间为5、10和15 min的螨的平均检出率分别为15%、18%和13%；添加螨量为30头时，静置时间为5、10和15 min的螨的平均检出率分别为31%、36%和36%，添加螨量一定时，不同静置时间对螨检出率的影响没有显著差异。

2.2 水温对螨检出率的影响

采用SPSS中单因素方差分析的Duncan检验对结果进行分析，不同水温对螨检出率的影响如图1所示，其中添加螨量为30头，图中不同水温间字母a、b、c表示差异具有统计学意义。

由图1可见，当水温为4℃时螨检出率最高，25、30和40℃水温的螨检出率略低，并且这3个温度间没有显著的差异，而50和80℃水温的螨检出 率最低。

不同溶解方式对螨检出率的影响如表2所示，其中添加螨量为30头，由于50和80℃的螨检出率较低，采用SPSS中独立样本t检验比较4、25、30和40℃水温下不同溶解方式对螨检出率的影响。表2的结果表明，不同溶解方式对螨检出率有影响，其中采用磁力搅拌溶解方式的螨平均检出率(345/12)显著高于采用玻璃棒搅拌的溶解方式(200/12) (P＜0.05)。

表2 溶解方式对螨检出率的影响

3 讨论

食糖中的螨污染情况与人们的健康有密切关系，GB 13104-2014《食糖》标准中螨的检验方法是添加20～25℃的水，并用洁净的玻璃棒不断搅拌至充分溶解，液面与玻片充分接触静置15 min后取下镜检。由表1结果可知，玻片静置时间5、10与15 min对螨检出率的影响无显著差异。黄世水、梁凤娇的研究中[12]也表明静置5、10与30 min的螨分离效果无明显差异，与本文研究结果一致。因此在螨的日常检测中，可以缩短静置时间，提高实验效率。

为研究溶糖水温对螨检出率的影响，分别研究了水温为4、25、30、40、50和80℃的螨检出率。结果表明水温4℃的螨检出率最高，50和80℃最低，25、30和40℃间无显著差异。4℃时螨检出率最高，可能与该温度下，水密度较高，表面张力较大，螨体与水体间密度差较大有关，检出率最高。有研究表明，水的温度与糖溶解效率呈正相关[13]，且4℃对于溶糖等操作带来一定的不便：首先，需预先制备4℃溶解水，其次在溶解时需保证较低的环境温度。我国甘蔗糖的产糖区主要集中在广西、云南等亚热带地区，常年均温在4℃以上，提供此实验条件需要大量耗能，不利于实际操作。25、30和40℃水温对螨检出率无显著性差异，考虑到与环境温度间的作用，可对实验用水轻微加热至40℃，以提高溶糖效率、可操作性和可重复性。50和80℃水温严重减少螨的检出率，不建议使用。综上，在一定范围内提高溶糖水温，可减少溶糖时间，提高实验效率，因此，日常检测中可选择40℃水温溶解食糖提高溶解效率。

标准中要求使用洁净的玻璃棒充分搅拌使食糖溶解，但在实际检测过程中，玻璃棒搅拌存在溶糖效率低，溶糖不充分等问题，影响螨检出率。由表2结果可知，采用磁力搅拌溶解方式的螨检出率显著高于采用玻璃棒搅拌溶解方式，这可能是由于螨体附着在玻璃棒上，未被充分洗脱；也可能是采用玻璃棒搅拌的方式，未使糖液被充分搅匀，白砂糖中的部分螨体未浮上来。

4 结论

本文研究了GB 13104-2014《食糖》标准中可能对螨的检出率有影响的相关因素，包括静置时间、水的温度和溶糖方式等，其中静置时间对螨检出率无显著影响，在日常检测中可通过缩短静置时间，进而提高检测效率。水温为4℃的螨检出率最高，50和80℃最低，25、30和40℃对螨的检出率无显著差异。采用磁力搅拌溶解方式的螨检出率显著高于采用玻璃棒搅拌溶解方式。因此参照GB 13104-2014标准，采用25～40℃的水，用磁力搅拌使食糖充分溶解后静置5 min后镜检，可以提高螨检出率，提高检测效率。