临床标本差异性对微生物检验阳性检出结果的影响

王茜

在临床当中,微生物检验实为其中的关键检验项目,用途多样,不仅用作诊断感染性疾病,而且还用于病情评估,能够为感染类疾病病情评估、疾病诊断及预后预测等,提供准确且可靠依据,但需要指出的是,因微生物有着比较多的种类,以及比较复杂的检验步骤,当前所用到的微生物检验技术的质量已经难以满足现实需要,特别是临床微生物检验过程中取样检测标本时,仍未能得到规范化,临床微生物检验过程中,通常需要检验多种临床样本,而临床样本不同,其在具体的微生物检验结果上,也会存在着比较大的差异［1］。因此,采取切实措施,强化病原微生物检测工作,提高阳性检出率,已经成为临床微生物检验工作当中的核心任务。本文围绕以2018 年8 月～2020 年9 月为时间节点,选取临床标本,测定其微生物阳性率,然后进行比较,从中剖析阳性检出率出现差异的主要原因,探讨临床微生物检验工作当中所存在的突出问题,以期为感染性疾病控制提供帮助,现就此探讨如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018 年8 月～2019 年8 月在本院进行检验的临床标本7850 份,2019 年9 月～2020 年9 月在本院进行检验的临床标本10609 份。在所有临床标本当中,9578 份为呼吸道标本,3529 份为脑脊液、胸腹水与血液样本,954 份为大便标本,4398 份其他非呼吸道标本,包含中段尿、伤口分泌物、穿刺液等。所选取标本在检测前,均未被污染。

1.2 方法 如痰液样本,在采集时,需要在清晨完成,叮嘱患者把痰液吐在带盖容器当中(干燥无菌),采集量≥1 ml；如果是尿液样本,需要在清晨进行采集,对中段尿液进行采集,采集量为5 ml。在采集血液样本前,患者需要在采集前一天禁食(6 h),采集清晨采血(肘静脉血),采集血量为5～10 ml。

把细菌培养标本接种到琼脂培养基当中,于特定温度(35℃)下孵育,平板静置72 h,接种普通肉汤管增菌,于孵育箱(35℃)中静置48 h,如果没有细菌生长,便为阴性；若发现存在细菌生长,即阳性。依据《全国临床检验操作规范》,采用VITEK 2 Compact 型全自动细菌鉴定及药敏分析仪(法国梅里埃公司),依据标准化流程开展各项操作,严格控制质量。质控菌株选用铜绿假单胞菌ATCC27853、大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923。

1.3 观察指标 比较两个时间段呼吸道、血培养、其他非呼吸道、大便微生物标本阳性率。

1.4 统计学方法 采用SPSS21.0 统计学软件处理数据。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2018 年8 月～2019 年8 月呼吸 道、血培养、其他非呼吸道标本以及合计样本阳性率均高于2019 年9月～2020 年9月,血培养标本阳性率低于2019 年9月～2020 年9 月,差异均具有统计学意义(P<0.05)。两个时间段大便标本比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两个时间段微生物标本阳性率比较［n,n(%)］

3 讨论

伴随信息技术的持续推新与完善,医学微生物学检验技术在此背景下,正在变得越发具有微量化、微机化、自动化,而且还朝向分子生物学领域不断发展,已经成为当前临床中诊治感染性疾病的重要支撑,特别是传染性疾病,其应用价值更为凸显。但需要指出的是,针对微生物检验而言,其仍然无法从根本上满足当前临床检验的各种需求,而在各种原因当中,最主要原因是临床标本检验有着比较低的阳性率。本文分两个时间段对临床标本的微生物检验阳性率进行比较,从中得知,在这两个时间段内所收集的临床标本,有着不同的微生物检验阳性率,究其原因,可能与如下因素相关：①采集微生物标本存在不规范情况。有报道［2］指出,之所以会出现实验结果不符合于临床诊断的情况,有75%由分析前原因所致,其中,针对分析前原因而言,其主要包含标本运输、患者准备、检验申请及标本采集等,当存在比较多的潜在因素,以及环节比较复杂时,容易出现各种问题。要想从根本上确保分析前质量,需要由医疗机构统一组织、执行。对于临床科室内工作的医务人员来讲,其无论是对采集标本的基本要求上,还是在所需注意事项上,均存在了解不足的情况,或者是未能严格遵照采集标本的基本要求来操作,其最终结果可能会引发标本不合格情况,降低病原微生物的检测率,或者所检测对象并非是致病微生物,如此一来,除了难以提供准确的病原信息之外,还会对临床医生诊治造成误导。比如大便培养、中段尿培养等,通常情况下,由患者本人对标本自行留取,若护理人员存在解释不足,或者是宣传不到位的情况,那么会降低患者正确留取标本的意识,非常容易出现未取到异常标本以及标本量不足等情况,从而降低微生物阳性检出率。针对微生物检验标本来分析,需要在用药开始前进行采集［3,4］。而对于痰标本,在进行分离、培养操作时,可用绵纤接种方法行此操作。在开展厌氧培养过程中,痰标本需采用标本的气管穿刺法来进行各项操作；针对尿标本来讲,需要通过膀胱穿刺操作来得到；对于大便样本,尽可能避免与空气接触。通过血培养对病原微生物进行检测,乃是对诸如败血症、菌血症等血液病进行诊断的关键依据,但在当前临床中,在采集血培养标本时,存在采血量少及采血时机不当等情况,比如成年人,其在具体的采血量上,需要在8～10 ml 之间,选择在发热高峰前,或者是发病初期进行采集最为合宜［5-7］。②保存、运送微生物标本存在不规范情况。在保存、运送微生物标本时,其基本原则就是对可能被非致病微生物污染的情况进行预防、使病原微生物保持良好的活力等［8,9］。需要强调的是,在检测微生物标本时,如果其检测目的不同,那么需要采用与之相匹配的运送、保存方法。比如用厌氧菌进行培养所得到的标本,需运送方法便比较特殊,即需做到即刻送检,不能与空气接触,不然会造成厌氧菌的大量死亡,从而降低阳性率。③检验人员缺乏相关经验。针对临床微生物检验而言,其多需要借助生理学、形态学的生化反应来进行,各步骤均需要有良好的判断力。所以,工作人员不断积累个人经验,丰富基础知识,尤为重要［10］。可以根据实验室需要,依据自身实验条件,编写详细且实用的标准操作程序手册,为全体工作人员工作提供指导。

在本次研究当中,2018 年8 月～2019 年8 月的总阳性率高于2019 年9 月～2020 年9 月,差异具有统计学意义(P<0.05)。但需要指出的是,本次研究未包含人型支原体、真菌学等的阳性报告,一年前,此些项目的阳性率起伏情况对本研究是否会有影响,仍需深究。

综上所述,检验人员需要做好与临床医生之间的沟通与联系,不断学习新知,丰富自己的专业知识,强化操作技能,促进个人理论水平的提升；此外,还需要不断改进操作技术,促进微生物检验质量的提升,最终达到提升临床微生物检验阳性率的目的,为临床疾病诊治提供可靠依据。