VEGF调控肥胖小鼠棕色脂肪组织炎症反应相关基因表达及通路的研究①

李思琦 芦小单 王国庆 高鸿霞（北华大学医学技术学院，吉林132013）

肥胖是一种低级别的慢性炎症性疾病，与2型糖尿病和胰岛素抵抗等代谢紊乱相关［1］。目前对肥胖的研究多集中在脂肪组织，而脂肪组织又分为白色脂肪组织（white adipose tissue，WAT）和棕色脂肪组织（brown adipose tissue，BAT）。白色脂肪细胞的主要作用是储存能量，而棕色脂肪细胞参与调节能量消耗和快速产热。近年研究发现，BAT通过减少脂肪炎症，能够抵抗高脂肪饮食（high fat diet，HFD）诱导的肥胖并维持全身葡萄糖稳态［2］。血管内皮生长因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGFA/VEGF）参与调控脂肪组织能量代谢，抑制VEGF表 达 的小鼠，能 够抵抗HFD诱导的肥 胖［3］。但VEGF调控BAT能量代谢的机制有待进一步研究。

RNA-Seq是近年发展起来的一种基于序列分析的检测整体转录组表达的方法。同早期的技术方法相比，如微列阵，RNA-Seq具有更广泛的动态范围和更高的检测低丰度转录本的灵敏度，允许检测更多的差异表达基因和更高的折叠变化［4］。本研究利用VEGF可逆抑制转基因小鼠，通过RNA-Seq建立了BAT转录组图谱，并筛选出VEGF正常表达组BAT和VEGF抑制表达组BAT中差异表达的基因，对其进行功能注释（GO）和信号通路（KEGG）富集分析，以探究VEGF调控BAT炎症反应的可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物文献［3］报道过四环素调节VEGF可逆抑制小鼠模型，小鼠饲养于东北师范大学转基因动物实验中心。温度（22±2）℃，湿度40%～70%，12 h/12 h光暗循环，可自由获取食物和水。所有程序均获得东北师范大学动物护理与使用委员会批准。将小鼠分为VEGF正常表达组（dox+组）和VEGF抑制表达组（dox-组），每组6～10只，所有小鼠选用基因型：VEGFtetO/tetO：bAKtg，小鼠出生后喂食普通饲料4周后换成高脂饲料喂养，持续8周。……