干扰lncRNA SBF2-AS1通过靶向调控miR-582-5p表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭*

张平弟，宣 佶，吴永丰

（1.东南大学附属中大医院江北院区，南京 210000；2.南京中医药大学，南京 210000）

乳腺癌是女性肿瘤中死亡率较高的恶性肿瘤，随着分子生物学和基因组学的发展以及精准医学的出现，分子靶向药物治疗成为乳腺癌的一种新型治疗方法[1]。靶向治疗的关键之一在于潜在治疗靶点的筛选，研究发现，非编码RNA（ncRNA）与乳腺癌的发生发展密切相关，可作为乳腺癌的潜在治疗靶点[2]。长链非编码核糖核酸（long non-coding Ribonucleic Acid,lncRNA）和微小RNA（microRNA，miRNA）均属于非编码RNA，与乳腺癌的发生发展、转移和预后相关，且lncRNAs 可与miRNA、信使RNA（messenger RNA，mRNA）或蛋白相互作用来调节相关基因的表达，从而影响乳腺癌的进展[3]。SBF2 反 义RNA1（SBF2 antisense RNA 1，SBF2-AS1）是一种新的lncRNA，SET结合因子2（set binding factor 2，SBF2）的反义RNA1，干扰SBF2-AS1可抑制宫颈癌细胞的增殖[4]。远处转移和复发是乳腺癌患者死亡的重要原因之一，而miRNA的异常表达与乳腺癌的转移及血管形成等密切相关[5]。生物学软件预测发现，SBF2-AS1 与miR-582-5p 有结合位点。研究报道，miR-582-5p可抑制骨肉瘤细胞的生长和侵袭[6]，但miR-582-5p 对乳腺癌细胞的影响尚不清楚。本研究旨在研究lncRNA SBF2-AS1 对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 乳腺癌细胞MCF-7、SK-BR-3、MDAMB-231和正常乳腺细胞MCF10A购自中国科学院上海细胞库；RPMI-1640 培养基购自美国Gibco 公司；Trizol 试剂、荧光定量试剂盒购自日本TaKaRa公司；双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自武汉纯度生物科技有限公司；Transwell 小室、基质胶购于美国BD 公司；MTT 试剂盒、RIPA 蛋白裂解液购自上海碧云天生物技术有限公司。

1.2 细胞培养与分组 乳腺癌细胞MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231 和正常乳腺细胞MCF10A 用RPMI-1640 培养基常规培养；……