急性时相蛋白与细胞因子检测在2型糖尿病患者中的作用及临床意义

董勃 丁甜

徐州市第一人民医院医学检验科，徐州 221000

2型糖尿病属于非胰岛素依赖型糖尿病，患者体内胰岛素处于一种相对缺乏状态，甚至有些患者胰岛素分泌过多，细胞功能出现障碍，胰岛素治疗效果受到影响，增加治疗难度。2型糖尿病对身体危害较大，可引发心脑血管、肾脏等相关并发症，一旦患病需终身治疗，长时间的治疗也增加了经济负担［1-2］。对于2型糖尿病需要及时对血糖进行控制，靶器官损伤也是需要关注的方面，特别是肾脏，其中血清α1-酸性糖蛋白（α1-AG）、铜蓝蛋白（CP）均属于急性时相蛋白，在糖尿病的发生和发展中发挥关键作用。白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）则属于炎性指标，机体长期处于高血糖状态下会对固有的免疫系统造成损伤，大量非特异性免疫系统被激活，单核细胞、巨噬细胞、T细胞和内皮细胞等产生大量细胞因子，使胰岛β细胞分泌功能受到损伤，发生胰岛素抵抗［3-4］。本研究对急性时相蛋白及细胞因子在2型糖尿病中的作用进行分析，现报道如下。

资料与方法

1.一般资料

回顾性分析2021年3月至2023年3月在徐州市第一人民医院接受治疗的2型糖尿病患者180例作为研究对象，其中尿蛋白排泄率＜20 µg/min设为正常组（90例），尿蛋白排泄率在20～200 µg/min设为异常组（90例），另选择同时期体检健康者180例。正常组男47例、43例，年龄63～82（72.78±13.44）岁；异常组男48例、女42例，年龄62～82（72.21±14.14）岁；体检健康者男90例、女90例，年龄61～82（71.98±13.44）岁。患者纳入标准：⑴符合世界卫生组织对于糖尿病的诊断标准［5］；⑵未接受规范性药物干预；⑶患者均知情同意并签署知情同意书。排除标准：⑴恶性肿瘤；⑵自身免疫系统疾病；⑶精神类疾病。3组一般资料比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），具有可比性。

本研究经徐州市第一人民医院伦理委员会审批通过（2021020008）。

2.方法

对受检者进行急性时相蛋白（α1-AG、CP）及细胞因子（IL-6、TNF-α）检测，采集空腹（8～12 h）静脉血6 ml，α1-AG、CP均使用免疫比浊法进行测定，在采集样本中抽取3 ml，待血液凝固后以4 000 r/min离心，离心半径13.5 cm，10 min后取血清，将50 µl血清加入1 000 µl的基质液中充分混合，37 ℃保温1 min，再次加入150 µl显色液，反应混合液吸入式分析仪中，分析波长377 nm，延迟时间15 s，测定时间30 s，以50 µl蒸馏水代替血清进行空白校正；IL-6采用电化学发光法进行测定，试剂盒由武汉华美生物工程有限公司提供，检测时严格参照操作手册和说明书进行，测试样本可通过仪器自动绘制曲线进行计算，获取浓度指标，如低于1.5 ng/L则表示IL-6＜1.5 ng/L，如高于5 000 ng/L则使用仪器进行1∶10的稀释，结果为稀释倍数的乘积，如稀释后仍存在指标高于5 000 ng/L情况，则表示IL-6＞5 000 ng/L；TNF-α采用酶联免疫吸附法，在检测时将50 µl标准品配置成不同浓度，加入到不同标准品孔，除空白孔外，在每孔加入100 µl辣根过氧化物酶，封孔，放于37 ℃温度内等待60 min，然后将液体去除，晾干加入350 µl洗涤剂，等待1 min后操作同上，然后再加入50 µl辣根过氧化物酶，继续37 ℃温度下等待15 min，完成后各个孔进行测试，比较差异。上述操作流程需在同一检验团队下完成，各项操作流程做好质控，检查前对仪器设备运行情况进行判断，确保可以正常运作，并且注意对试验台进行清理，以保证检验结果的准确性。

3.观察指标

⑴对比体检健康者与2型糖尿病患者急性时相蛋白（α1-AG、CP）及细胞因子（IL-6、TNF-α）；⑵对比2型糖尿病患者不同尿蛋白排泄率下检测结果及不同尿蛋白排泄率下治疗结果，指标包括血清α1-AG、CP、IL-6、TNF-α，以后期随访、追踪及治疗为依据。

4.统计学处理

采用SPSS 23.0统计学软件，符合正态分布的计量资料采用均数±标准差（）表示，组间比较采用独立样本t检验；计数资料采用例（%）表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

结果

1.体检健康者与2型糖尿病患者指标检测结果比较（表1）

表1 体检健康者与2型糖尿病患者急性时相蛋白及细胞因子检测结果比较（）

表1 体检健康者与2型糖尿病患者急性时相蛋白及细胞因子检测结果比较（）

注：α1-AG为α1-酸性糖蛋白，CP为铜蓝蛋白，IL-6为白细胞介素-6，TNF-α为肿瘤坏死因子-α

TNF-α（ng/L）9.78±3.44 20.23±4.76 23.873＜0.001组别体检健康者2型糖尿病t值P值例数180 180 α1-AG（mg/L）468.38±67.37 1 114.36±223.32 37.155＜0.001 CP（mg/L）2.46±1.12 17.21±1.64 99.946＜0.001 IL-6（ng/L）4.38±1.35 13.41±1.28 65.122＜0.001

2型糖尿病患者血清α1-AG、CP、IL-6、TNF-α指标均高于体检健康者，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

2.两组2型糖尿病患者不同尿蛋白排泄率下检测结果比较（表2）

表2 2型糖尿病患者不同尿蛋白排泄率下检测结果比较（）

表2 2型糖尿病患者不同尿蛋白排泄率下检测结果比较（）

注：尿蛋白排泄率＜20 µg/min为正常组，尿蛋白排泄率在20～200 µg/min为异常组；α1-AG为α1-酸性糖蛋白，CP为铜蓝蛋白，IL-6为白细胞介素-6，TNF-α为肿瘤坏死因子-α

TNF-α（ng/L）9.78±3.44 15.23±4.76 8.804＜0.001组别正常组异常组t值P值例数90 90 α1-AG（mg/L）623.45±87.33 1 232.22±344.32 16.258＜0.001 CP（mg/L）2.46±0.74 6.21±1.64 19.773＜0.001 IL-6（ng/L）4.38±1.35 9.41±1.28 25.650＜0.001

异常组患者血清α1-AG、CP、IL-6及TNF-α指标均高于正常组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

3.两组2型糖尿病患者不同尿蛋白排泄率下治疗结果比较（表3）

表3 2型糖尿病患者不同尿蛋白排泄率下治疗结果比较（）

表3 2型糖尿病患者不同尿蛋白排泄率下治疗结果比较（）

注：尿蛋白排泄率＜20 µg/min为正常组，尿蛋白排泄率在20～200 µg/min为异常组；α1-AG为α1-酸性糖蛋白，CP为铜蓝蛋白，IL-6为白细胞介素-6，TNF-α为肿瘤坏死因子-α

TNF-α（ng/L）4.33±1.11 9.67±1.21 30.852＜0.001组别正常组异常组t值P值例数90 90 α1-AG（mg/L）345.87±76.43 766.87±67.21 39.242＜0.001 CP（mg/L）1.34±0.23 3.67±0.34 53.849＜0.001 IL-6（ng/L）2.12±0.87 5.34±1.21 20.498＜0.001

异常组患者治疗后血清α1-AG、CP、IL-6及TNF-α指标均高于正常组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

讨论

2型糖尿病的发病主要是由遗传、环境以及生活习惯共同作用的结果，属于胰岛素依赖型糖尿病，患者自身胰岛功能并未完全消失，临床出现胰岛素抵抗、胰岛素分泌异常，血糖超出正常水平，如任其发展不进行控制，可导致肾脏功能异常，引发各种并发症，对疾病的有效控制和科学干预非常关键［6］。2型糖尿病按照病程可分为糖尿病前期、临床期以及并发症发病期，治疗中需严格控制血糖［7-8］。目前，对于糖尿病的病因尚未完全阐明，但研究发现可能与机体炎症反应有关，机体内免疫系统诱导、细胞因子介导的急性时相反应，急性时相蛋白作为重要炎症因子，由脂肪细胞分泌出IL-6、TNF-α会对肝脏的合成进行刺激，导致CP指标提升，引发血糖升高［9-10］。本研究显示，2型糖尿病患者血清α1-AG、CP、IL-6及TNF-α指标均高于体检健康者（均P＜0.05）。分析原因：血清α1-AG是肝脏合成分泌的一种蛋白质，为血清黏蛋白的主要成分，含糖量为40%［5，11-12］。α1-AG水平改变可用于鉴别急性时相反应或雌激素引起的急性时相蛋白（如CP、α1-抗胰球蛋白等）水平升高，若为后者则α1-AG浓度正常或降低，前者可出现血清水平升高［13］；CP是一种急性期反应蛋白，主要负责将铜从肝脏输送至各个组织中，铜经小肠吸收后在肝细胞微粒体上与CP结合，通过血液输送至肾脏进行存储［14］；IL-6则会对胰岛β细胞产生影响，对活性和功能造成损伤，正常状态下胰岛分泌的IL-6可维持胰岛功能正常需求，对于胰岛分泌胰岛素具有调节或控制效应，而胰岛功能出现问题后胰岛周围局部释放不同的细胞因子，导致B淋巴细胞分化，过量的免疫球蛋白G基因和促进杀伤性的T淋巴细胞克隆过度激活，对自身破坏加重，细胞因子和效应因子毒性结合，引发胰岛β细胞死亡，加重2型糖尿病进程［15-17］；TNF-α是具有多种生物学效应的炎症性细胞因子，在机体多个炎症病变方面发生重要作用，可促进胰岛β细胞中一氧化氮生成，诱发胰岛素抵抗，同时还可抑制胰岛素信号传递，在2型糖尿病的发展中发挥重要作用［18-19］。

本研究结果显示，尿蛋白排泄率异常患者血清α1-AG、CP、IL-6及TNF-α指标均高于正常组患者（均P＜0.05）。分析原因：2型糖尿病引发的靶器官损伤也是需要关注的问题，其中对肾脏损伤属于关注焦点，有数据显示超过1/3的患者合并糖尿病肾病，该疾病属于常见的难治性并发症，早期症状表现为微量白蛋白尿，随之出现临床蛋白尿，发展成慢性肾功能不全，最终进展成为终末期肾损伤，需要借助血液透析完成治疗，对机体损伤严重［20-23］。因此，早期诊断和干预非常重要。α1-AG、CP均属于急性时相蛋白，反映人体处于慢性炎症反应状态，而炎症可通过多种途径导致肾脏损伤，可引发机体氧化应激反应，使低密度脂蛋白氧化成氧化低密度脂蛋白，直接损伤肾小球内皮细胞，修饰血管壁蛋白，使管壁增厚，弹性下降，对肾小球血管造成严重损伤［11］；IL-6释放继发性细胞因子，刺激系膜细胞增殖，诱发肾小球的病理性改变，引发肾脏结构和功能异常［24］；TNF-α刺激肾小球细胞释放更多胶原酶，蛋白大量降解，而细胞合成增加，引发系膜细胞结构和形态变化，对肾脏的微血管造成损伤［25］。TNF-α还可提升单核细胞趋化蛋白分泌，诱导细胞外基质增加，使肾脏出现慢性炎症和纤维化，引发肾脏方面疾病。因此，上述指标对于糖尿病肾病的诊断也具有一定的促进作用，可及时发现肾脏损伤，并对疾病进行干预［26］。而对于尿蛋白排泄率异常人群，治疗难度增加，治疗后各项指标较高，需要更加关注肾脏功能的恢复［27-28］。

综上分析，2型糖尿病进行急性时相蛋白与细胞因子检测可对肾脏功能进行判断，确定是否存在肾病，而细胞因子与肾脏损伤的严重程度存在联系。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突

作者贡献声明董勃、丁甜：酝酿和设计试验，实施研究，采集、分析/解释数据，起草文章，对文章的知识性内容作批评性审阅，统计分析，获取研究经费，行政、技术或材料支持，指导，支持性贡献