不同炮制方法对中药黄芪化学成分的影响

李曼曼 刘 永

1许昌市中医院中西药房，河南许昌 4610002惠州市九惠制药股份有限公司技术研发部，广东惠州 516007

黄芪是豆科植物黄芪的干燥根，属于常用的中药材，其中黄酮类、糖类、氨基酸类、皂苷类是其主要成分。临床应用黄芪治疗疾病时，普遍通过炮制的方法以降低药物毒性、提高疗效。研究[1]表明，不同的中药炮制方法会导致中药的成分含量产生差异，从而导致效用存在差别。因此，本研究采用炒黄芪、酒黄芪、生黄芪三种炮制方法，探究其对黄芪黄酮类、糖类成分的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

笔者选用的中药黄芪，均为同一批次，且购买自同一家药材公司。所需器材及药品为：紫外线分光光度仪(上海天呈医流科技股份有限公司，型号：721-110)、电子分析天平(美国梅特勒公司，精密度0.001 g)、高效液相色谱仪(上海费尔伯恩精密仪器有限公司，型号：26963)；毛蕊异黄酮、芒柄花素、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷、浓硫酸、苯酚、葡萄糖对照品、甲醛、甲酸、蒸馏水等，均购自上海纯优生物科技有限公司。

1.2 炮制方法

炒黄芪：取出300 g黄芪，使用文火翻炒黄芪，直至颜色转为棕黄色，并晾干备用；酒黄芪：取出300 g黄芪，加入米酒60 ml搅拌，黄芪、米酒充分浸润后，静置1 h，并炒干备用；生黄芪：取出300 g黄芪，用40℃左右的温水浸泡5 min，浸泡后用温麻布覆盖在黄芪上进行润化，2 h后切成小片，并干燥至恒重，最后晾干备用。

1.3 样品溶液制备

①水溶性糖的提取：从炮制的各类黄芪中，分别取出100 g研磨成粗粉，放置于锥形瓶，加入30 ml的85%乙醇混合，混合充分后放置水浴锅中水浴，温度为50℃，时间60 min，水浴后，使用纱布过滤，并加热去除乙醇，然后用蒸馏水稀释至100 ml，吸取2 ml到25 ml的量瓶，加水至相应刻度备用；②还原性糖的提取：从炮制的各类黄芪中，分别取出100 g磨成粗粉，放置于圆底烧瓶，加入蒸馏水20 ml回流，并离心过滤残渣，在残渣中加入热水洗涤3次，过滤液混合，加入Ba(OH)2、5% ZnSO4，直至无沉淀产生，过滤到容量瓶，定容到100 ml，再吸取1 ml到25 ml的量瓶，加水至相应刻度备用；③多糖的提取：从炮制的各类黄芪中，取出定量的黄芪磨成粗粉，加入10倍量蒸馏水回流60 min，并离心过滤残渣，残渣使用8倍量的水回流30 min，滤液混合备用；④取黄酮类对照品，进行精密称重，加入甲醇后，移至50 ml容量瓶，定容后摇匀，获得不同质量浓度的毛蕊异黄酮、芒柄花素等对照样品液。

1.4 检测项目

①检测不同炮制方法黄酮类成分的含量，包括毛蕊异黄酮、芒柄花素、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷等的含量；②检测不同炮制方法糖类成分的含量，包括水溶性糖、还原性糖、多糖等的含量。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 不同炮制方法黄酮类含量比较

炮制后，酒黄芪毛蕊异黄酮含量显著高于生黄芪、炒黄芪(P<0.05)；酒黄芪、生黄芪芒柄花素含量均显著高于炒黄芪(P<0.05)，其中酒黄芪与生黄芪比较，差异无统计学意义(P>0.05)。酒黄芪毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷含量显著高于生黄芪、炒黄芪(P<0.05)，其中炒黄芪含量最低；酒黄芪、生黄芪芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量显著高于炒黄芪(P<0.05)，其中酒黄芪与生黄芪比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

成分酒黄芪炒黄芪生黄芪毛蕊异黄酮158.06±6.30*△106.30±8.44104.32±10.39芒柄花素77.90±8.32△41.35±5.33*72.03±7.01△毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷469.32±32.01*△315.54±20.01*403.32±30.20△芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷148.02±10.33△118.36±3.01*147.30±10.39△

与生黄芪比较*P<0.05；与炒黄芪比较△P<0.05

2.2 不同炮制方法糖类含量比较

炒黄芪、酒黄芪水溶性糖含量均显著高于生黄芪(P<0.05)，其中炒黄芪、酒黄芪水溶性糖含量比较，差异无统计学意义(P>0.05)；炒黄芪还原性糖含量显著高于酒黄芪、生黄芪(P<0.05)；炒黄芪、酒黄芪多糖含量均显著高于生黄芪(P<0.05)，其中炒黄芪、酒黄芪多糖含量比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 不同炮制方法黄芪糖类成分含量比较

与生黄芪比较*P<0.05；与炒黄芪比较△P<0.05

3 讨论

中药黄芪具有补气固表、利尿、托毒排脓、生肌的功效，属补虚药下属分类的补气药，临床常用于治疗气短心悸、乏力虚脱、自汗浮肿、久泻脱肛、子宫脱垂、痈疽难溃、疮口难愈、支气管哮喘、乙型肝炎、慢性肾炎等病症。相关研究[2]显示，不同的炮制方法对黄芪的功效影响较大，因此，需要了解不同炮制方法的效用差别。临床中，炒黄芪侧重于益气健脾，主治食欲不振、便溏气虚；酒黄芪侧重于泻火解毒、清热燥湿、止血，主治肺热咯血、咳嗽目赤；生黄芪侧重于固表止汗，主治自汗浮肿、心悸体虚。本研究结果表明，酒黄芪毛蕊异黄酮含量明显高于生黄芪、炒黄芪，且酒黄芪、生黄芪芒柄花素含量高于炒黄芪；酒黄芪毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷含量高于生黄芪、炒黄芪，而酒黄芪、生黄芪芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量高于炒黄芪；表明酒黄芪的炮制方法所保留的黄酮类成分较多，多于炒黄芪、生黄芪，并且其含有较多的毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷，这与李利明[3]研究结果一致。黄芪中的黄酮类成分具有抗氧化、抗病毒、抗癌、降血糖、神经保护、骨骼保护、改善疲劳等作用[4]，对于治疗心肌缺血、心力衰竭等病症具有重要作用[5]。此外，炒黄芪、酒黄芪水溶性糖含量高于生黄芪，炒黄芪还原性糖含量高于酒黄芪、生黄芪，炒黄芪、酒黄芪多糖含量高于生黄芪，表明炒黄芪最大限度地保留了黄芪的糖类成分，且多于酒黄芪、生黄芪，这与余文强[6]的研究结果一致。糖类成分属于黄芪中的重要活性部分，具有抗病毒、抗肿瘤以及提高免疫力的功效，对于调节机体免疫力具有重要作用[7]。然而，江国荣等[8]研究结果表明，生黄芪的水溶性糖含量，酒黄芪的多糖成分，均要高于炒黄芪，与本研究结果不一致。因此，需要进一步研究这三种炮制方法对黄芪糖类成分的影响。

综上所述，不同的炮制方法，对中药黄芪的黄酮类及糖类成分影响较大，因此，须根据临床具体需要选择适宜的炮制方法。