铜绿假单胞菌肺炎鼠动物模型中炎性介质浓度分析

于柏峰,谷海瀛,赵振东,翟英超

（海南省人民医院输血科,海口 570311）

铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa,PA）是引起人类感染的传统致病菌,也是医院内呼吸道感染的常见病原菌之一。由其引起的感染具有难治性、高耐药性和高病死率的特点,在院内感染和临床抗感染治疗中占有极其重要的地位[1]。感染后引发炎性反应,在炎性反应的基础上,会引起一定程度的肺纤维化[2]。本研究应用PA引起的慢性呼吸道感染的鼠动物模型,通过检测其肺泡灌注液中白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素8（IL-8）以及血清中核基质蛋白-2（MMP-2）浓度变化,对由其引起的炎性反应及肺纤维化程度进行研究,为由该菌引起疾病的诊断和治疗提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物与主要试剂 6～8周龄雄性昆明小鼠（清洁级标准,体质量26～32g）由海南省人民医院实验动物中心负责饲养,所有的小鼠处于自然活动状态。IL-1β、IL-8及M MP-2检测试剂盒由美国R＆D Systems公司提供。

1.2 菌株配制[3]将标准菌株PA27853（来自于军事医学科学院菌种保藏中心）接种到血平板,选取经过对数生长期的标准菌株27853单个菌落接种到2mL TSB中,37℃、18h扩增。菌液浓度用10倍稀释的TSB琼脂培养基评估。用麦氏比浊管比浊,相当于 0.5个麦氏单位（大约 1.3×108CFU/mL）。

1.3 实验动物分组情况 将55只小鼠分为3组：A组25只,经支气管接种无菌琼脂糖珠悬液50μ L；B组25只,经支气管接种富含PA琼脂糖珠悬液50μ L；C组5只,不接种,作为健康对照组。

1.4 感染实验动物 小鼠气管切开,分别注入50μ L有PA或无菌琼脂糖珠悬液。立即竖起小鼠,保持2min,使菌液流下进入肺内,小鼠有类似呛咳反应。……