李学慧,代丽丽,董 玫,张 霞,谢 磊,张红真△
(河北医科大学:1.第一医院妇产科;2.基础医学院,河北石家庄050011)
目前化疗已成为治疗中、晚期恶性肿瘤的重要方法,但是现有的绝大多数化疗药物细胞毒作用大、组织特异性差,易产生耐药性等问题一直困扰着临床医生。因此,寻找毒副作用低,抗耐药性强,组织特异性强的化疗药物已成为国内、外研究的热点之一。自天然产物紫杉醇作为抗癌药物应用到临床以来,与其结构相似药物的开发已愈来愈受到重视。有研究报道,日本粗榧果实中分离出的二萜类化合物kayadiol对人白血病细胞K562细胞增殖有抑制作用[1-2]。目前对二萜类化合物的抑瘤活性的研究比较少见,关于kayadiol抑制细胞增殖作用机制的研究更少见报道。本研究将二萜类化合物kayadiol作用于人子宫内膜癌HEC-1细胞株,观测其对子宫内膜癌细胞的生物学影响,并探讨其内在机制。
1.1 材料 人子宫内膜癌细胞株HEC-1由日本千叶大学医学部第二生物化学教室提供。实验用化合物kayadiol由河北医科大学药学院天然药物化学教研室提供。四甲基偶氮唑盐(MTT)和顺铂(cisplatin)购自美国Sigma公司;胎牛血清、RPMI1640、胰蛋白酶购自GIBCO公司;TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(11684795910)购自德国Roche公司;十二烷基硫酸钠(SDS)购自美国Biotec公司;鼠抗人半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)多克隆抗体、鼠抗人 Bax多克隆抗 体 (sc-7480)、羊抗鼠IgG红外荧光二抗及β-actin购自美国Santa Cruz公司;溴化乙锭购自美国Sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 体外抑瘤实验 取对数生长期HEC-1细胞,调整细胞……