3-MA通过抑制自噬反应提高结肠癌5-FU的化疗效果

侯 妮，刘 娜，韩 佳，李 杰

(西安交通大学：1. 医学部细胞生物学与遗传学系，陕西西安 710061；2. 第二附属医院普通外科，陕西西安 710004)



3-MA通过抑制自噬反应提高结肠癌5-FU的化疗效果

侯 妮1，刘 娜1，韩 佳1，李 杰2

(西安交通大学：1. 医学部细胞生物学与遗传学系，陕西西安 710061；2. 第二附属医院普通外科，陕西西安 710004)

目的 探索新的联合化疗方案以提高5-FU为基础的结肠癌化疗效果。方法 研究5-FU(7.5 μmol/L)、3-MA(5 mmol/L)以及两种药物联合使用对人结肠癌细胞株HCT116的自噬及凋亡影响。MTT、Hoechst+PI染色检测细胞生长及凋亡，MDC染色观察细胞内自噬反应，Western blotting观察细胞内的凋亡及自噬相关蛋白改变。将HCT116细胞注射至裸鼠皮下建立在体肿瘤模型并进行治疗，观察肿瘤生长情况。结果 MTT检测结果显示HCT116在5-FU作用下细胞生长受到抑制，Hoechst+PI染色显示5-FU联合3-MA组凋亡数量较5-FU组明显增加；Western blotting检测5-FU联合3-MA组的凋亡蛋白Caspase-3、PARP表达较5-FU组明显增高。同时，MDC染色以及自噬特异性蛋白LC3II检测发现在5-FU作用下自噬反应升高，而通过3-MA抑制5-FU引起的细胞自噬反应，细胞生长抑制率从5-FU单独作用的(51.64±4.04)%提高至(79.89±1.35)%，凋亡增加超过100%。皮下注射HCT116细胞的裸鼠肿瘤模型，5-FU联合3-MA组较单独使用5-FU组有效抑制肿瘤生长，肿瘤体积及质量均明显减少。结论 3-MA可抑制5-FU处理引起的细胞自噬反应，促进细胞凋亡，HCT116细胞生长抑制率明显增加；为提高5-FU为基础的结肠癌化疗提供新思路。

结直肠癌；5-FU；3-MA；凋亡；自噬；化疗；Caspase-3；PARP；LC3

结直肠癌是一种严重威胁人类健康的疾病，发病率居各种恶性肿瘤第2位，致死率居第3位。发展中国家近年来的结直肠癌发病率明显升高，且趋于年轻化[1]。……