姜黄素对人乳腺癌MCF-7 细胞抗增殖作用的探讨

田丽丽，闫全志，索菲娅，赵慧英

（内蒙古自治区肿瘤医院，内蒙古 呼和浩特）

0 引言

随着饮食结构及社会压力等因素，肿瘤发病率逐年上升，其中乳腺癌成为威胁女性健康的恶性肿瘤，目前治疗乳腺癌的主要方法是以化学治疗为主。现行的化疗药物存在毒副作用大、患者生活质量下降等缺点，因此替代化疗药物，找到毒副作用小、疗效好的新型抗肿瘤药物有必要的现实意义。姜黄素（Curcumin）是从姜黄的根茎中提取的酚性色素。近年来，诸多研究表明，姜黄素具有显著的抗癌活性[1]，对体内及体外肿瘤的生长具有较好的抑制作用，同时可以诱导肿瘤细胞凋亡，目前已成为肿瘤预防和治疗的一个研究热点[2]。本实验通过观察人乳腺癌细胞MCF-7 细胞在不同姜黄素浓度作用条件下增殖抑制变化，为姜黄素在抗乳腺癌的深入研究提供一定的理论基础与实验依据。

1 内容与方法

1.1 一般资料

MCF-7 细胞购自上海生物制品研究所。姜黄素购于Sigma 公司，以少量二甲亚砜（DMSO）溶解姜黄素粉剂，配成1 mmol/L 溶液（储备液），放置-20 ℃冰箱保存，使用时稀释至所需浓度（DMSO 终浓度＜0.1%）。

1.2 方法

选取对数生长期且状态良好的乳腺癌MCF-7 细胞，将细胞消化、计数，稀释终浓度为5×l04/mL，接于96 孔板中，每孔10 μL，放入细胞培养箱中培养；待细胞贴壁后加入姜黄素，使其终浓度分别为10 μM/L、20 μM/L、40 μM/L、80 μM/L，同一浓度设定3 个平行复孔，设细胞对照组；在细胞培养箱中培养时间分别为24 h、48 h、72 h，每孔加入5 mg/mL 的MTT 15 μL，培养4 h，弃上清液，每孔加入150 μL 的DMSO，酶标仪震荡3 min，570 nm 处检测吸光值。

实验结果按以下公式计算：细胞存活率=实验组光吸收值/对照组光吸收值×100%。

药物抑制率=(1-实验组光吸收值/对照组光吸收值)×100%。

1.3 统计学方法

使用EXCEL 分析软件，实验结果以均数±标准差表示，应用t检验统计方法，以P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 姜黄素作用MCF-7 细胞的OD 值

对照组的细胞随着时间的延长明显增长，24 h 后，20 μM/L、40 μM/L、80μM/L 组的OD 值与对照组有显著性差异（P＜0.05），10 μM/L 与对照组相比较，非显著性差异（P＞0.05）；48 h 后，各实验组的MCF-7 细胞均受到姜黄素的抑制，与对照组比较均有显著性差异（P＜0.05）；72 h 细胞抗增殖作用更为明显，与对照组相比，具有显著性差异（P＜0.05），随着姜黄素浓度的增加，抑制作用增强，具有剂量依赖性的趋势，结果见表1。

随着姜黄素浓度的升高及作用时间的延长，细胞的存活率呈下降趋势，具体见图1。

图1 姜黄素作用MCF-7 细胞的存活率（%）

表1 姜黄素作用MCF-7 细胞的OD 值（±s, μM/L）

表1 姜黄素作用MCF-7 细胞的OD 值（±s, μM/L）

注：a：与对照组比较，P＜0.05；b：与10 μM/L 比较，P＜0.05；c：与20 μM/L 比较，P＜0.05；d：与40 μM/L 比较，P＜0.05。

时间24 h 48 h 72 h对照组 0.942±0.029 1.456±0.065 1.696±0.063实验组10 0.941±0.027 0.771±0.081a 0.862±0.099a 20 0.668±0.0771ab 0.717±0.044a 0.795±0.029a 40 0.557±0.042ab 0.498±0.067abc 0.493±0.108abc 80 0.416±0.072abcd 0.401±0.085ab 0.263±0.105abc组别

2.2 姜黄素对MCF-7 的细胞抑制率

不同浓度姜黄素在不同时间内对细胞的抑制程度不同，其抑制率与浓度呈正相关，与时间亦呈正相关（P＜0.05），结果见图2。

图2 姜黄素对MCF-7 的细胞抑制率（%）

2.3 姜黄素对MCF-7 的细胞作用不同时间的IC50 值

三个不同时间点内，MCF-7 细胞对姜黄素有剂量依赖的趋势，其IC50值在随着时间的延长有下降趋势，以48h 作用点尤为明显，具体结果见图3。

图3 姜黄素对MCF-7 的细胞作用不同时间的IC50 值（μM/L）

3 讨论

姜黄素是从中药姜科植物根茎里提取的化合物，能特异性的诱导乳腺癌细胞凋亡、影响乳腺干细胞以及抑制乳腺癌细胞代谢等影响，在预防乳腺癌及协同化疗药物治疗方面能有效的促进细胞的凋亡。姜黄素的药理作用很多，如具有消炎、抗氧化、抗增殖及抗肿瘤[3]等作用，抗癌谱较广[4]、毒副作用小，是一种非常有前景的抗肿瘤新药。本实验研究发现，姜黄素对MCF-7 细胞具有较好的抗增殖作用，细胞存活率与浓度及时间呈负相关；不同浓度的姜黄素在不同时间内对细胞的抗增殖程度不同，其抑制率与浓度呈正相关，与时间亦呈正相关；在不同的时间点其IC50值呈下降趋势。

综上所述，姜黄素对MCF-7 细胞有很好的抗增殖作用，姜黄素在抗乳腺癌的深入研究提供一定的理论基础与实验依据。