VmaH和PMA在指状青霉中的表达及其作为潜在杀菌作用靶点的可能性

范 明，彭丽桃，闫 等，范 刚，杨书珍，李 杰

（华中农业大学食品科技学院，湖北 武汉 430070）

由指状青霉（Penicillium digitatum）侵染导致的柑橘绿霉病是引起采后柑橘腐败变质的重要原因。据统计，约有90%的腐烂柑橘果实是由于被指状青霉侵染所致，经济损失巨大[1]。目前，化学杀菌剂处理仍是控制柑橘采后贮运病害的重要手段，但化学杀菌剂的长期大量使用使得病原真菌的抗药性日益增强，杀菌剂的使用周期显著缩短[2-4]。因此，研究与开发具有新型药物作用靶点的杀菌剂对柑橘采后安全生产具有十分重要的意义。

酸碱平衡是维持细胞内环境稳定、保证细胞正常代谢与功能的前提[5]。为了适应更多极端的生长和侵染环境，真菌细胞较其他真核生物具有更强大的pH值调控和H+转运机制[6]。其中V型ATP酶质子泵（vacuolar H+-ATPase，V-ATPase）和P型质子泵（plasma membrane H+-ATPase，P-ATPase）在保持细胞内的pH值动态平衡和建立细胞膜内外的质子梯度中起着关键作用[7-9]。在球孢白僵菌的研究中发现V-ATPase功能的缺失导致细胞内pH值和钙离子的失衡，从而影响了真菌细胞骨架的维持[6]。对白色念珠菌的研究表明[10]，编码V-ATPase亚基的基因缺失会导致菌株毒力降低。Billack等[11]研究也发现P-ATPase在白色念珠菌致病力上具有重要作用。因此，V-ATPase和P-ATPase在真菌细胞生命活动和对寄主的侵染过程中发挥着重要作用。

VmaH（vacuolar ATP synthase subunit H）基因所编码的蛋白是V-ATPase的一个关键亚基，它不但调控复合体V1和V0的组装，而且还通过调控ATP（水解ATP）活性而调控H+跨膜运输[12]。Rizzo等[13]研究表明VmaH基因表达水平的差异会影响V-ATPase的组装。VmaH基因的缺失会导致害虫的死亡和真菌侵染毒力的下降[14-15]。……