夏力旦·阿力甫 鲁 英 崔 蓉
多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是一类广泛存在于环境中的持久性有机污染物。有研究发现,PAHs暴露可能与糖尿病的发生有关[1]。环境污染物暴露导致mtDNA拷贝数的异常变化,并且与机体多种不良结局有相关性,如心血管疾病和糖尿病等[2,3]。胎儿对多环芳烃引起的DNA损伤程度可能比母亲敏感10倍且可能会引发成人期的慢性疾病[4]。
本研究用PAHs的典型代表苯并[a]芘{benzo[a]pyrene,BaP}染毒,观察不同剂量BaP染毒后,Wistar母鼠及子代血糖及mtDNA拷贝数差异性,为进一步探索孕期BaP暴露与子代糖代谢的关联性提供依据。
1.试剂及仪器:纯度为99.0%的苯并[a]芘(德国 Dr.Ehrenstorfer 公司)、水合氯醛(天津福晨化学试剂有限公司)、血糖仪(江苏鱼跃医疗设备股份有限公司)、ELISA试剂盒(上海江莱生物科技有限公司)、全自动石蜡包埋机及切片机(德国徕卡仪器有限公司)、组织基因组DNA提取试剂盒(天根生化科技公司)、分光光度计(美国赛默飞世尔科技公司)、荧光定量PCR仪(美国赛默飞世尔科技公司)。
2.实验对象:SPF(specific pathogen free)级健康未生育Wistar雌鼠24只,平均体质量为213.20±9.57g。雄鼠8只,平均体质量为211.10±8.85g。由新疆医科大学医学实验动物中心提供,实验动物许可证号:SCXK(新)2018-0002。动物研究遵循了新疆医科大学医学实验动物中心有关实验动物管理和使用规定并通过了伦理审批,伦理审批号:20190226-30。
3.动物交配:适应期饲养1周,第8天晚8:00时按照雄雌1∶3比例进行合笼,次日晨用棉棒以0.9%NaCl溶液在阴道口缓慢插入雌鼠的阴道,取内容物,均匀涂抹载玻片,放置于光学显微镜下观察,两名操作者分别核查,均发现精子者判定为受孕,记为妊娠第1天。……