酸枣仁皂苷A促进大鼠股骨骨折愈合的机制研究

张兵 朱亚辉 王孝玉 周思私 袁发 胡凌云

据统计，骨折后延迟愈合或不愈合的比例约为10%[1-2]。其中骨折断端处的炎症反应被认为是骨折延迟愈合的重要原因之一[3]。酸枣仁皂苷A是从酸枣仁中分离得到的三萜皂苷，具有抗氧化、抗炎症、抗凋亡和神经保护等多种生物活性[4-5]。本研究团队通过前期实验发现，酸枣仁皂苷A可以通过激活生长转化因子/骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）通路诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞分化，形成骨组织，用于治疗骨折延迟愈合或不愈合非常有潜力（尚待发表）。本研究通过构建大鼠股骨骨折模型，探讨酸枣仁皂苷A是否通过NF-κB信号通路对骨折愈合产生促进作用，以期为临床应用提供实验基础。

1 材料和方法

1.1 实验动物 健康SPF级雄性SD大鼠40只，体重（220±20）g，购自成都达硕实验动物有限公司，生产许可证号：SCXK（川）2020-030，使用许可证号：SYXK（川）2019-189。本实验经南充市中心医院医学伦理委员会伦理审批通过[2021年审（032）号]。

1.2 主要药物、试剂和仪器 酸枣仁皂苷A（批号：A0274），纯度≥98%，购自成都曼思特生物科技有限公司；BMP-2（批号：ab214821）、NF-κB 抑制剂蛋白-α（nuclear factor kappa B inhibitor protein，IκB-α）（批号：ab32518）、NF-κB 抑制蛋白激酶-β（nuclear factor kappa B inhibitor protein kinase，IκK-β）（批 号 ：ab178870）、NF-κB（批号：ab76302）和 β-肌动蛋白（β-actin）（批号：ab6276）抗体均购自艾博抗（上海）贸易有限公司；IL-1β（批号：ml003057）、IL-6（批号：ml102828）、TNF-α（批 号 ：ml002859）、ALP（批号：ml003360）、骨钙素（bone gla protein，BGP）（批号：ml002883）ELISA 检测试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司。VTE1600动物数字化X线影像系统购自南京普爱医疗设备股份有限公司；转轮式切片机购自德国徕卡公司；TSJ-Ⅱ型全自动封闭式组织脱水机、BMJ-Ⅲ型包埋机、PHY-Ⅲ型病理组织漂烘仪均购自常州市中威电子仪器有限公司；……