线粒体分裂抑制剂1对胶原诱导性关节炎小鼠疾病进展的抑制作用和机制

王晓艳 陈祝锋 方瑜 周瑞 高飞

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以关节滑膜炎为主要病理表现的自身免疫性炎症性疾病，滑膜局部表现为CD4+T淋巴细胞大量浸润。研究发现滑膜局部调节性 T 细胞（regulatory T cells，Tregs）/Th17的失衡与RA疾病发生密切相关，通过调节两者表达可达到缓解疾病的目的[1]。线粒体分裂抑制剂1（mitochondrial division inhibitor-1，Mdivi-1）通过抑制线粒体动力相关蛋白 1（dynamin-related protein 1，DRP1）的三磷酸鸟苷酶活性，抑制线粒体分裂，达到治疗多种疾病的目的[2]。Li等[3]报道，Mdivi-1可通过抑制Th1/Th17细胞，促进Tregs的表达，抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎的疾病进展。本研究通过动物实验来探讨Mdivi-1是否可通过调节滑膜局部Tregs及Th17细胞的表达来抑制胶原诱导性关节炎（collagen induced arthritis，CIA）的进展，现将结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 实验动物和材料 7周龄雄性SPF级DBA/1小鼠16只，体重18～20 g，购自北京维通利华公司。Ⅱ型胶原（美国Chondrex公司，批号：20022）；弗氏不完全佐剂（美国Chondrex公司，批号：7002）；弗氏完全佐剂（美国Sigma公司，批号：F5881）；二甲基亚砜（dihydroethidium，DMSO）（上海碧云天生物技术有限公司，批号：ST038）；Mdivi-1（美国 Sigma 公司，批号：M0199）；兔源IL-10多克隆抗体、兔源IL-17多克隆抗体、兔源叉头状转录因子（forkhead box protein 3，Foxp3）多克隆抗体、HRP标记山羊抗兔（武汉塞维尔生物科技有限公司，批号依次为：GB11108、GB11110、GB11093、GB23303）。本实验经陕西中医药大学伦理委员会审批通过。

1.2 CIA小鼠模型构建及治疗 取相同体积Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂，冰上乳化15～20 min，待滴在水面不扩散即可，放置冰盒中备用。将小鼠固定，露出尾部，消毒，在距尾根部2 cm处皮下注射100 μl上述乳化剂。第21天，取相同体积Ⅱ型胶原和弗氏不完全佐剂，冰上乳化15～20 min，在距尾跟部3 cm处皮下注射100 μl。……