干预miR-31对哮喘小鼠肺组织TGF-β1/Smad3、TLR2/MyD88/NF-κB信号通路的影响

李玲 李庆玲 刘文春

支气管哮喘（简称哮喘）是一种由嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞等参与的异质性疾病，其主要特征为气道组织慢性炎症反应，患者主要临床表现为胸闷、咳嗽、反复喘息等，对患者身体健康、生活质量造成严重影响[1-3]。流行病学调查显示，儿童、老年人群为哮喘主要发病群体，近年来我国哮喘发病率一直居高不下，症状严重程度随时间变化而不断改变，多数患者清晨、夜晚时间症状较为严重[4]。研究发现，若哮喘症状不能及时根治，病情可能会不断发展而造成气道重塑[5]。因此，对哮喘进行及时有效的治疗具有重要意义。目前尚无一种特效的治疗哮喘的药物。研究发现，miR-31在哮喘症状中表达异常，其表达变化与炎症反应密切相关，与哮喘病情具有一定的相关性，miR-31对哮喘具有一定的诊断价值[6]。但关于调控miR-31表达对哮喘干预效果的研究还鲜有报道。本研究通过建立小鼠哮喘模型，探讨干预miR-31对哮喘小鼠肺组织转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）/果蝇 MAD 基因 3 哺乳动物类似基因（drosophila mad gene 3 mammalian like gene，Smad3）、Toll样受体 2（toll-like receptor 2，TLR2）/髓样分化因子（myeloid differentiation factor 88，MyD88）/NF-κB 信号通路的影响。

1 材料和方法

1.1 实验动物 SD健康雄性小鼠40只，年龄7～10（8.5±1.2）周，体重 19～28（23.5±3.6）g，购自洛阳普万泰生物技术有限公司。在相对湿度50%～55%、温度（23.1±1.9）℃的环境中喂养1周，光照12 h/d。本研究经医院医学伦理委员会审批通过。

1.2 主要试剂和仪器 大鼠抗小鼠miR-31抗体（美国Invitrogen公司，批号：C1358）；兔抗小鼠 CD44抗体（美国BD公司，批号：N3667）；小鼠抗兔IFN-γ抗体（丹麦Dako公司，批号：D8569）；小鼠抗大鼠 IL-2、IL-4、IL-22、IL-3 抗体（美国 Selleck 公司，批号：S8753、S2357、S1675、S2565）；大鼠抗小鼠总抗氧化能力（total antioxidant capacity，TAOC）、一氧化氮（nitric oxide，NO）抗体（美国Hyclone 公司，批号：A25291、A23652）；……