巴戟天寡糖对大鼠子宫缺血再灌注损伤的抗炎作用*

程亮星(郑州大学第一附属医院《肿瘤基础与临床》编辑部，河南 郑州 450052)

子宫缺血再灌注损伤是临床常见的子宫不可逆性损伤，严重者可能会影响子宫正常受孕和生育等功能[1]。炎症反应被证实在多种器官或组织的缺血再灌注损伤过程中发挥重要作用。因此，通过减轻子宫缺血再灌注损伤过程中的炎症反应可能起到保护子宫缺血再灌注损伤的作用。肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、白介素-6(interleukin-6，IL-6)和白介素-8(interleukin-8，IL-8)是重要的炎症反应因子，在炎症反应过程中这些因子的过表达均可导致炎症反应的加重[2-3]。巴戟天寡糖提取自补肾壮阳中药巴戟天的肉质根，研究证实其具有提高免疫力、调节内分泌、抗氧化、抗凋亡等药理学作用，在多种器官或组织的缺血再灌注损伤过程中具有对抗损伤的作用[4-6]。为寻找新型的能高效干预子宫缺血再灌注损伤的药物，本研究采用线栓法制备大鼠子宫缺血再灌注损伤模型，观察了巴戟天寡糖对子宫缺血再灌注损伤过程中炎症反应的影响。

1 材料与方法

1.1 动 物

50只SPF级健康雌性Wistar大鼠，均为6月龄，体质量(378±23)g，购自河南省实验动物中心，并饲养于该中心，动物合格证号为SCXK(豫)2010-0002。

1.2 药品、试剂与仪器

巴戟天寡糖由河南大学药学院提取，具体方法参照文献[7]。TNF-α、IL-1β和IL-6 酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒，均购自美国RD公司，批号依次为SRTA00、SRLB00、SR6000B；IL-8 ELISA试剂盒，购自美国MyBioSource公司，批号为MBS282844)。SynergyTM H1型全自动酶联免疫分析仪，美国BioTek公司产品；Biofuge Stratos台式高速低温离心机，德国Heraeus公司产品。

1.3 动物分组与给药方法

将50只大鼠随机分为假手术组，模型对照组，巴戟天寡糖低、中、高剂量组5组，每组10只。巴戟天寡糖低、中、高剂量组按体质量依次给予质量分数70，140，280 g/L巴戟天寡糖液10 μL/g灌胃，假手术组和模型对照组按体质量给予10 μL/g双蒸水灌胃，每天1次，连用7 d。

1.4 大鼠子宫缺血再灌注损伤模型的建立

各组大鼠末次给药后1 h采用线栓法制备大鼠子宫缺血再灌注损伤模型[2]：以质量分数10 g/L的戊巴比妥钠(0.4 μL/g)腹腔注射麻醉大鼠，腹部正中切口；经大隐静脉注射50 u /kg肝素钠；钝性分离腹主动脉，在髂总动脉分叉处上0.5 cm处结扎腹主动脉(假手术组大鼠仅穿线，不结扎)，结扎30 min；解除结扎线，复灌60 min；采用过量戊巴比妥钠麻醉，使大鼠死亡；取出子宫，于-80 ℃冰箱中保存。

1.5 检测指标

每例子宫标本称取100 mg，制成生理盐水匀浆，4 ℃、4 000 r/min离心15 min，取上清液，采用酶联免疫吸附测定法检测TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平，操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.6 统计学方法

2 结 果

与假手术组对比，模型对照组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平升高，差别有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组对比，巴戟天寡糖3个剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平降低，差别有统计学意义(P<0.05)。巴戟天寡糖3个剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平两两对比，差别均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

组 别TNF-α/(ng·g-1)IL-1β/(ng·g-1)IL-6/(ng·g-1)IL-8/(ng·g-1) 假手术组31．82±3．6019．41±2．5155．04±5．0443．57±4．25 模型对照组74．04±3．75∗∗49．65±4．37∗∗132．84±8．51∗∗112．64±6．22∗∗ 巴戟天寡糖高剂量组39．81±2．71##25．88±2．63##78．39±4．57##66．39±4．94## 巴戟天寡糖中剂量组46．13±3．39##△△31．13±2．42##△△93．23±3．90##△△78．02±3．73##△△ 巴戟天寡糖低剂量组53．55±4．57##△△＊＊34．71±2．26##△△＊＊101．81±7．22##△△＊＊87．83±6．77##△△＊＊ F193．714148．916222．766231．929 P<0．001<0．001<0．001<0．001

注：与假手术组对比，**P< 0.01；与模型对照组对比，##P< 0.01；与巴戟天寡糖高剂量组对比，△△P< 0.01；与巴戟天寡糖中剂量组对比，＊＊P< 0.01

3 讨 论

炎症反应是一种常见的病理生理现象，是由众多炎症因子共同作用而产生的。炎症反应广泛参与衰老、肿瘤、心肌梗死、脑梗死等多种疾病的疾病进展过程。在心、脑、肾、肝、肺等多种器官或组织的缺血再灌注损伤过程中也有炎症反应的存在，许多炎症因子已经被证实在这一过程中水平明显升高[5-6]。TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8均属于炎症因子，其水平的高低间接反映了炎症反应的程度。有研究[7]证实：在心肌缺血再灌注损伤的过程中，TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低，而IL-10的水平则明显升高，并且这一现象能够被药物干预。目前，关于抗缺血再灌注损伤药物的研究是这一领域的热点问题，而炎症反应已经被证实参与了多种器官或组织的缺血再灌注损伤，并且这一过程能够被药物干预，也就是说通过抗炎能够对抗缺血再灌注损伤的进展[8]。本研究采用线栓法制备大鼠子宫缺血再灌注损伤模型，观察巴戟天寡糖干预对子宫缺血再灌注损伤过程中炎症反应的影响，初步探讨巴戟天寡糖用于对抗缺血再灌注损伤的可能性。

本研究结果显示：与假手术组对比，模型对照组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平升高(P<0.05)，提示子宫经过缺血再灌注的过程，出现了炎症反应。与模型对照组对比，巴戟天寡糖3个剂量组的TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平降低(P<0.05)，表明巴戟天寡糖用于子宫缺血再灌注损伤模型，能够改善其炎症反应的损伤。巴戟天寡糖3个剂量组的TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平两两对比差别均有统计学意义(P<0.05)，且随着巴戟天寡糖质量分数的增加，炎症因子的水平降低，表明巴戟天寡糖具有剂量依赖性的抗炎作用。

综上所述，巴戟天寡糖能够减轻子宫缺血再灌注损伤后的炎症反应，从而发挥保护子宫免受缺血再灌注损伤的作用。

4 参考文献

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*基金项目：河南省医学科技攻关计划项目(201702092)